Spherisorb色譜柱使用的其他重要信息
A. 使用窄徑-內(nèi)徑 3.0 mm色譜柱
本節(jié)將介紹如何盡量減少柱外效應(yīng),并介紹在HPLC系統(tǒng)中盡可能提高窄徑色譜柱性能的原則。使用內(nèi)徑3.0 mm的窄徑色譜柱時(shí)通常無(wú)需更改系統(tǒng)配置。但使用內(nèi)徑2.1mm的色譜柱時(shí),需要更改HPLC系統(tǒng)配置才能避免系統(tǒng)譜帶展寬體積過(guò)大。如果不恰當(dāng)?shù)馗南到y(tǒng)配置,會(huì)因系統(tǒng)譜帶展寬體積過(guò)大而導(dǎo)致峰展寬,隨著峰體積減小,這會(huì)對(duì)峰寬造成嚴(yán)重影響。
B. 譜帶展寬體積對(duì)2.1 mm內(nèi)徑色譜柱性能的影響
注:在色譜柱后使用分流器會(huì)加劇譜帶展寬。
系統(tǒng)優(yōu)化可能對(duì)靈敏度和分離度產(chǎn)生巨大影響,對(duì)于配置了分流器的系統(tǒng)尤其如此。優(yōu)化措施包括使用深度正確的錐箍以及盡可能減小管路內(nèi)徑和長(zhǎng)度。圖8給出了一個(gè)示例,通過(guò)優(yōu)化LC/MS/MS系統(tǒng),代謝物測(cè)定的靈敏度和分離度提高了一倍。
C. 未優(yōu)化和優(yōu)化的LC/MS/MS系統(tǒng)對(duì)比:
系統(tǒng)配置更改建議
1. 將微內(nèi)徑檢測(cè)器流通池與內(nèi)徑 ≤ 2.1 mm的色譜柱配合使用。
注:為減小譜帶展寬體積而縮短流通池光程時(shí),檢測(cè)器靈敏度也會(huì)隨之降低。
2. 盡可能減小樣品定量環(huán)體積。
3. 在泵和進(jìn)樣器之間使用0.009英寸(0.25 mm)的管路。
4. 對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng),其余連接請(qǐng)使用0.009英寸(0.25 mm)的管路,對(duì)于窄徑(內(nèi)徑2.1 mm)系統(tǒng),其余連接請(qǐng)使用0.005英寸(0.12mm)的管路。
5. 使用完全接合的(預(yù)切割)連接(如果使用不同供應(yīng)商的色譜柱,請(qǐng)使用深度可調(diào)的連接頭)。
6. 檢測(cè)器的時(shí)間常數(shù)應(yīng)縮小至0.2 s以下。
D. 保護(hù)柱和色譜柱組件
這些端接頭和附件可用于 4.6 mm、4.0 mm 或 3.0 毫米內(nèi)徑保護(hù)柱
描述
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Qty
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Part No.
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可拆卸柱接頭
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2/pk
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PSS614100
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色譜柱篩板(2um)
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5/pk
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PSS614103
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色譜柱篩板(0.5 μm)
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5/pk
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PSS614104
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色譜柱連接件
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2/pk
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PSS614102
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長(zhǎng)尾接頭加長(zhǎng)端
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2/pk
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PSS614101
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用于10 mm內(nèi)置式保護(hù)柱芯的延長(zhǎng)接頭
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1/pk
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PSS614108
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色譜柱封堵
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1/pk
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WAT015674
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卡套柱封堵
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10/pk
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PSS614113
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10 mm保護(hù)柱芯的卡套
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PSS830008
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1. 30 mm保護(hù)柱柱芯/保護(hù)柱(不包括兩端可拆卸柱街頭,接頭需單獨(dú)訂購(gòu))
2. 用于10 mm內(nèi)置式保護(hù)柱芯的延長(zhǎng)接頭 PSS614108
3. 10 mm內(nèi)置式保護(hù)柱芯
4. 色譜柱連接件 PSS614102
保護(hù)柱芯的卡套
用于10 mm保護(hù)柱芯的延長(zhǎng)接頭
30 mm保護(hù)柱與Spherisorb連接